一般
第一,安捷伦色谱柱种类繁多,需要区分种类进行洗涤。
其次,作为普通C18柱,尤其是硅胶基质的普通C18柱,是流动相对色谱柱的酸、碱、盐、水的损害。你可以 水不要太多(除了带AQ的纯水柱,所有品牌一般都有这个防水柱)。个人认为只要水的流动相超过80 %, C18的寿命就会缩短。因此,在做高水相的流动相分析时,请注意选择合适的色谱柱。酸对色谱柱的损害是不可逆的,因此必须控制PH值。我个人认为任何PH低于2的人都要做好废柱的准备。碱性条件是C18硅胶基质的弱点。一般硅胶基质的C18碱性条件不是很耐用,现在也有PH11的碱性柱,但是比较贵。盐对色谱柱的影响主要是盐析造成的,而且是致命的。
第三种洗法。应根据使用的流动相和样品的不同清洗方法来区分清洗方法。一般不加酸碱盐不需要过多洗涤样品,水相也不高(如甲醇水60:40)。洗涤的目的是洗去样品中的杂质。保存流动相。在酸碱条件下,原则上酸碱要洗出色谱柱,存放在甲醇水中(比如60:40的配比可以根据要用的流动相,只要水相不高)。盐的条件麻烦,处理不好,不仅色谱柱坏了,仪器也麻烦。常用的是高水相流动相甲醇-水(10: 90)洗出盐(注意压力),然后用纯甲醇冲洗(这一步是为了恢复高水对色谱柱的损伤),最后储存在一般的甲醇-水体系中。
第四,冲洗时注意压力。最好从小流量慢慢增加流量到允许的压力范围。冲洗时间,确切地说是流速,通常是色谱柱冲洗的柱体积的10-20倍。
1.将套圈固定器插入柱芯。
2.将两个护套插入柱芯的凹槽中,使护套高于柱芯()。
3.向上推动已经套在柱芯上的套圈固定器,直到它高于套圈。
4.放
a对于几天内的短期放置,应先用溶剂清洗色谱柱。(如果凝胶柱用蒸馏水冲洗),然后用密封螺钉密封色谱柱的两端。
B.如果长时间不使用色谱柱,应该用色谱柱使用说明书规定的溶剂填充色谱柱,然后用密封螺钉将色谱柱两端密封。
C.色谱柱应储存在4℃的室温下。如果放在0℃以下的环境中,色谱柱会冻结,也会导致柱效下降。
D.注意溶剂的PH值。一般硅胶基质的色谱柱控制在2 ~ 8的范围内。
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